手把手教你挑选PCR管离心机
在新冠疫苗还没全面普及的时期,各位粉丝是否面临过被核酸检测支配的恐惧呢?医务工作者2周一次鼻拭子/咽拭子已经成为常态,泪眼婆娑的时候不一定是难过或感动,还可能是刚做完核酸检测。
在这个“邪恶”的小棉签背后,就是在疫情期间发挥巨大作用的核酸检测。而作为核酸检测重要的支撑,PCR技术再一次大放异彩。
PCR实验中,你遇到过这样的问题吗?
•反应不完全/反应终体积差异大
•条带强弱不同
•样品凝胶回收不够
•拷贝数差异巨大
如果你曾经遇到过类似的问题,
那么你需要注意的是:PCR管上机前你离心了吗?
要知道,PCR反应体系小,以10-50μL居多,PCR仪为底部加热模式,如果反应混合液混匀后发生挂壁现象,用手甩小体积液体根本下不来!
这就很容易造成反应不完全或者反应终体积差异大,最终影响实际反应条件的一致性和结果的可重复性:例如条带强弱怎么不同、样品凝胶回收又不够、拷贝数差很多……
PCR管体积通常是200μl,又有单管、排管、96孔板之分,并不是我们常用的ep管规格,在这种情况下,要怎么离心呢?